人體組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn) 版權(quán)信息
- ISBN:9787030707871
- 條形碼:9787030707871 ; 978-7-03-070787-1
- 裝幀:一般膠版紙
- 冊數(shù):暫無
- 重量:暫無
- 所屬分類:>>
人體組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn) 內(nèi)容簡介
本教材主要根據(jù)醫(yī)學(xué)本科生組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)需要,一方面培養(yǎng)學(xué)生熟練地使用顯微鏡去觀察標(biāo)本的能力,并通過引導(dǎo)學(xué)生對機(jī)體正常的細(xì)胞、組織和器官三個層次內(nèi)容的觀察、辨認(rèn)、描述和討論,加深學(xué)生對人體基本結(jié)構(gòu)的認(rèn)識與理解。另一方面,培養(yǎng)學(xué)生對模型和實(shí)體標(biāo)本的觀察了解和認(rèn)識人體胚胎早期發(fā)生與發(fā)育的規(guī)律。以驗(yàn)證和鞏固理論知識,并培養(yǎng)學(xué)生分析問題、解決問題和動手操作的能力。本書共分為兩篇。篇為“組織學(xué)與胚胎學(xué)基本形態(tài)結(jié)構(gòu)”,共分為十九個章節(jié)。每個章節(jié)都有“翻轉(zhuǎn)課堂讀切片”、“示教切片”和“課堂作業(yè)”三個部分,而各個重要的器官、結(jié)構(gòu)和細(xì)胞都配有高、低倍多組顯微圖片,主要培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用光學(xué)顯微鏡觀察組織學(xué)標(biāo)本,將組織學(xué)的實(shí)踐與理論密切結(jié)合、深入理解,以及靈活應(yīng)用的能力。同時,通過觀察模型和結(jié)合實(shí)物標(biāo)本,建立動態(tài)變化和立體概念。在理解人胚的正常發(fā)育的基礎(chǔ)上,掌握一些常見的先天性畸形的發(fā)生。第二篇為“組織學(xué)常用研究技術(shù)與方法”,包括十三個實(shí)驗(yàn)。通過對學(xué)生進(jìn)行組織學(xué)常用研究技術(shù)的操作方法與應(yīng)用能力的培訓(xùn),讓學(xué)生了解常用形態(tài)學(xué)的研究技術(shù),鍛煉實(shí)驗(yàn)技能,激發(fā)科研興趣,以及培養(yǎng)創(chuàng)新能力。 本書適合醫(yī)藥院校本科生使用。
人體組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn) 目錄
**篇 組織學(xué)與胚胎學(xué)基本形態(tài)結(jié)構(gòu)
**章 緒論(Introduction) 1
第二章 上皮組織(Epithelial Tissue) 7
第三章 固有結(jié)締組織(Connective Tissue Proper) 14
第四章 軟骨和骨(Cartilage and Bone) 18
第五章 血液(Blood) 25
第六章 肌組織(Muscle Tissue) 30
第七章 神經(jīng)組織(Nervous Tissue) 35
第八章 循環(huán)系統(tǒng)(Circulatory System) 44
第九章 免疫系統(tǒng)(Immune System) 51
第十章 內(nèi)分泌系統(tǒng)(Endocrine System) 59
第十一章 消化管(Digestive Tract) 66
第十二章 消化腺(Digestive Gland) 76
第十三章 呼吸系統(tǒng)(Respiratory System) 83
第十四章 泌尿系統(tǒng)(Urinary System) 88
第十五章 男性生殖系統(tǒng)(Male Reproductive System) 92
第十六章 女性生殖系統(tǒng)(Female Reproductive System) 96
第十七章 皮膚(Skin) 101
第十八章 感覺器官(Sensory System) 106
第十九章 人體胚胎早期發(fā)育(Human Embryogenesis and Early Development) 111
第二篇 組織學(xué)常用研究技術(shù)與方法
第二十章 研究技能性實(shí)驗(yàn)(Research Skill Experiment) 121
實(shí)驗(yàn)一 蘇木精- 伊紅染色法 121
實(shí)驗(yàn)二 透射電鏡技術(shù) 123
實(shí)驗(yàn)三 疏松結(jié)締組織鋪片的染色 126
實(shí)驗(yàn)四 血涂片的染色 126
實(shí)驗(yàn)五 精子涂片的染色 127
實(shí)驗(yàn)六 細(xì)胞活力鑒定- 臺盼藍(lán)染色法 128
實(shí)驗(yàn)七 運(yùn)動終板壓片的氯化金- 甲酸染色法 128
實(shí)驗(yàn)八 嗜銀細(xì)胞和嗜銀纖維的浸銀染色法 129
實(shí)驗(yàn)九 多糖的PAS 染色法 130
實(shí)驗(yàn)十 脂肪染色的蘇丹Ⅲ染色法 131
實(shí)驗(yàn)十一 堿性磷酸酶的Gomori 染色法 132
實(shí)驗(yàn)十二 SABC 免疫組織化學(xué)染色法 132
實(shí)驗(yàn)十三 形態(tài)計量術(shù) 133
人體組織學(xué)與胚胎學(xué)實(shí)驗(yàn) 節(jié)選
**篇組織學(xué)與胚胎學(xué)基本形態(tài)結(jié)構(gòu) **章緒論(Introduction) 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求 1.熟練地使用顯微鏡,能夠觀察、辨認(rèn)和描述機(jī)體正常結(jié)構(gòu)以驗(yàn)證和鞏固理論知識,達(dá)到理論與實(shí)踐相結(jié)合的目的。 2.通過對機(jī)體細(xì)胞、組織和器官三個層次內(nèi)容的觀察與討論,逐步培養(yǎng)學(xué)生對人體基本結(jié)構(gòu)的認(rèn)識與理解,并培養(yǎng)學(xué)生分析問題、解決問題和動手操作的能力。 3.了解組織切片的一般制作過程、常用的染色方法和組織細(xì)胞的染色特性。 4.能夠正確地描述和繪制組織或器官的基本形態(tài)結(jié)構(gòu)。 5.在整個教學(xué)過程中,嚴(yán)格按照“三基”(基本理論、基本知識和基本技能)和“三嚴(yán)”(嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度、嚴(yán)格的科學(xué)作風(fēng)和嚴(yán)密的科學(xué)方法)的要求進(jìn)行學(xué)習(xí)活動。 6.以現(xiàn)代教育理論為指導(dǎo),以現(xiàn)代教育技術(shù)為平臺和手段,以教師為主導(dǎo),以學(xué)生為中心,培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立觀察與思考、綜合分析與鑒別判斷,以及準(zhǔn)確描述形態(tài)結(jié)構(gòu)的能力。 7.通過本課程的學(xué)習(xí),了解本學(xué)科的近現(xiàn)代發(fā)展概況、重要科學(xué)成就、主要研究方法和研究進(jìn)展等,為后續(xù)醫(yī)學(xué)相關(guān)課程的學(xué)習(xí)奠定良好的基礎(chǔ)。二、實(shí)驗(yàn)方式與注意事項(xiàng) (一)實(shí)驗(yàn)方式 本課程采用“先理論后實(shí)驗(yàn)”的教學(xué)方法。每個實(shí)驗(yàn)教學(xué)班 15~ 30名學(xué)生,由 1名教師進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)。教學(xué)實(shí)驗(yàn)室為每位學(xué)生配備一臺光學(xué)顯微鏡以供獨(dú)立觀察之用,并配備數(shù)字交互式微型攝像系統(tǒng)和多媒體投影設(shè)備輔助實(shí)驗(yàn)教學(xué)。實(shí)驗(yàn)教學(xué)按照大綱,通過導(dǎo)學(xué)、觀察與思考、翻轉(zhuǎn)課堂與討論,以及檢查與總結(jié)等教學(xué)環(huán)節(jié),一方面加深了學(xué)生對組織學(xué)理論知識的理解,鍛煉了學(xué)生對組織或器官標(biāo)本的組織學(xué)形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察、描述和判斷的基本技能,另一方面也培養(yǎng)了學(xué)生在自主學(xué)習(xí)、獨(dú)立思考、積極動手、勇于表達(dá)、小組合作等方面的綜合素質(zhì)。 (二)注意事項(xiàng) 1.學(xué)生應(yīng)以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度,認(rèn)真有序地完成各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容,嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則。2.學(xué)生須提前10分鐘到實(shí)驗(yàn)室,不遲到,不早退,不得無故缺席和中途離開實(shí)驗(yàn)室。 每次實(shí)驗(yàn)要穿戴好整潔的工作服并攜帶好實(shí)驗(yàn)**用品,如理論教材、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)、實(shí)驗(yàn)報告紙、鉛筆、紅藍(lán)彩色鉛筆和尺子等。 3.顯微鏡必須經(jīng)常保持清潔。機(jī)械部分可用紗布或綢布擦凈;光學(xué)部分只能用擦鏡紙輕輕擦拭,嚴(yán)禁用手或其他物品擦拭以防污損。 4.實(shí)驗(yàn)課前必須做好每次實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的預(yù)習(xí)。在教師的指導(dǎo)下,嚴(yán)格按照教學(xué)要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并獨(dú)立而有序地完成每次實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容。學(xué)生有問題舉手提出,積極思考并參與問題的討論。 5.認(rèn)真而仔細(xì)地觀察每張組織或器官標(biāo)本。不得擅自移動示教鏡、示教鏡上的組織切片,以及其他實(shí)驗(yàn)器材。 6.愛護(hù)和正確使用一切實(shí)驗(yàn)標(biāo)本、儀器設(shè)備和其他公物,一經(jīng)損壞立即向老師報告,并做好登記。 7.要保持實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生,不得隨便丟棄雜物等。每次實(shí)驗(yàn)后,值日同學(xué)要認(rèn)真地做好實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生清理工作,并經(jīng)教師檢查合格后方可離開。 (三)實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果的檢測方法 1.通過翻轉(zhuǎn)課堂、教師提問、線上線下測試等手段,檢驗(yàn)學(xué)生對實(shí)驗(yàn)相關(guān)理論知識的掌握程度。 2.通過翻轉(zhuǎn)課堂、分組討論與結(jié)果展示等環(huán)節(jié),考查學(xué)生分析問題與解決問題、自主學(xué)習(xí)與小組協(xié)作,以及表達(dá)展示等方面的能力。 3.通過檢測學(xué)生在鏡下以及圖片上辨認(rèn)與判斷重點(diǎn)教學(xué)目標(biāo)的正確率,量化實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效果和學(xué)生的綜合實(shí)驗(yàn)技能水平。 4.實(shí)驗(yàn)課課堂作業(yè)評閱采用形成性評價的方式進(jìn)行,按 A、B、C、D 4個等級進(jìn)行評價。三、顯微鏡的使用和注意事項(xiàng) (一)顯微鏡的使用方法 1. 位置一手握持鏡臂,另一手托住鏡座。放置桌面,距桌沿不得少于 10cm。課間休息離開座位時,應(yīng)將顯微鏡移向桌內(nèi),以免碰落損壞。 2. 對光打開電源,旋轉(zhuǎn)光線旋鈕至合適光亮。轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤,將低倍物鏡對正載物臺的圓孔,轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使載物臺距物鏡約 5mm。用雙眼從目鏡觀察,調(diào)節(jié)雙筒目鏡間距離,直到看到一個均勻明亮的視野。 3. 低倍鏡的使用取標(biāo)本擦凈,使蓋玻片朝上,放在載物臺上,用推片器夾緊,并將組織切片推移到載物臺圓孔的正中。然后,以雙眼從目鏡觀察,同時轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使載物臺慢慢下降至物像清晰。必要時,再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)焦距。 4. 高倍鏡的使用先將需高倍鏡觀察的組織區(qū)域于低倍鏡下移至視野正中,然后轉(zhuǎn)入高倍鏡。再從目鏡觀察,并轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器至物像清晰。 5. 油鏡的使用先在高倍鏡下將需觀察的組織移至視野正中,轉(zhuǎn)離高倍鏡。在標(biāo)本上滴液狀石蠟一滴,轉(zhuǎn)換油鏡,此時油鏡頭浸入油滴而不與玻片接觸。再從目鏡觀察,并轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器至物像清晰。使用油鏡時,注意光線要明亮。 6.本教材中一般低倍指的是 4倍或 10倍,高倍指的是 40倍。 (二)顯微鏡使用的注意事項(xiàng) 1.搬動顯微鏡慎拿輕放,使用顯微鏡要嚴(yán)格遵守規(guī)程。 2.觀察時應(yīng)同時睜開兩眼。右手書寫者,以左眼從目鏡觀察,以右手操縱粗、細(xì)調(diào)節(jié)器。用右眼和右手配合進(jìn)行繪圖或文字描述。 3.顯微鏡必須經(jīng)常保持清潔。機(jī)械部分可用紗布或綢布擦凈;光學(xué)部分只能用擦鏡紙輕輕擦拭,嚴(yán)禁用手或其他物品擦拭以防污損。 4.油鏡使用后,應(yīng)立即用擦鏡紙蘸少量專用清洗劑將鏡頭擦凈。隨后應(yīng)對沾油的玻片也進(jìn)行相應(yīng)清潔。 5.顯微鏡部件不得拆卸或互相調(diào)換,若有故障,應(yīng)立即報告老師進(jìn)行處理,不得自行修理。 6.顯微鏡用畢,應(yīng)將物鏡轉(zhuǎn)離載物臺中央的圓孔,并上升載物臺,將顯微鏡輕輕放回原處。 四、光學(xué)顯微鏡的標(biāo)本制作 在組織研究中*常見的方法是制備可以借助光學(xué)顯微鏡( light microscope,LM)觀察的組織切片。這些標(biāo)本的制作方法包括石蠟切片法、冷凍切片法、撕片法、涂片法和磨片法等,實(shí)驗(yàn)課中使用*多的是石蠟切片法制作的組織切片。*常用、使用*廣泛的染色技術(shù)是蘇木精 –伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining),簡稱 HE染色法。蘇木精為堿性染料,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸呈紫藍(lán)色。伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的某些成分呈紅色。 石蠟切片 HE染色法標(biāo)本制作的基本步驟包括取材、固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、貼片、脫蠟、染色和封片等步驟,具體步驟如下: 1. 取材和固定根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康娜〕鋈嘶騽游锏男迈r組織,并將其盡快投入固定液內(nèi),一般固定 6~ 24h。固定的目的是使組織內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固,防止自溶,以保持組織原來的結(jié)構(gòu)成分和形態(tài)結(jié)構(gòu)。常用的固定液有多聚甲醛( paraformaldehyde)、酒精和 Bouin液等。 2. 脫水和透明固定液一般為水溶液,如前面采用的是石蠟包埋,應(yīng)先進(jìn)行脫水。為減少組織收縮的影響,脫水時應(yīng)從低濃度乙醇開始,從 60%、70%、80%、90%、 95%,逐步過渡到無水乙醇,以徹底置換出組織中的水分。組織脫水后,再將其投到二甲苯中,以置換出乙醇并利于包埋劑滲入,至組織透明取出。 3. 浸蠟與包埋把透明后的組織塊放入融化的石蠟中(溫度為 56~ 60℃),時間 2~ 3h,使石蠟完全充填于組織間隙內(nèi)。隨后以常溫冷卻,石蠟?zāi),組織塊即包埋在石蠟中。 4. 切片與貼片包埋好的組織塊用切片機(jī)切成 5~ 7μm的薄片。在溫水中展平,后貼附于載玻片上。 5. 染色和封片染色的目的是使組織內(nèi)不同的結(jié)構(gòu)染上不同的顏色,以利于鏡下觀察。 HE染色法步驟如下: (1)脫蠟:將切片放入二甲苯內(nèi)約 10min,再入 100%、95%、90%、80%、70%乙醇各 5~ 10min;入水?dāng)?shù)分鐘。 (2)染核:入蘇木精染液 5~ 10min,用水洗去多余染液,入 0.5%~ 1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒鐘,水洗分化約 1min。 (3)染胞質(zhì):放入伊紅染液 2~ 3min,用 70%乙醇進(jìn)行分色。 (4)脫水:經(jīng) 80%、90%、95%、100%乙醇各脫水一次,每次 5~ 10min。 (5)透明:放入二甲苯透明 2次,每次 10~ 15min。 (6)封固:在切片組織所在處滴加適量封片劑,后放上蓋玻片封閉保存,干燥后便可鏡下觀察。 結(jié)果:細(xì)胞核呈紫藍(lán)色;細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色。 五、電子顯微鏡的標(biāo)本制作 在組織學(xué)研究中較常見的電子顯微鏡主要包括透射電鏡( transmission electron microscope,TEM)和掃描電鏡(scanning electron microscope,SEM)兩大類。本章節(jié)主要介紹透射電鏡超薄切片的制作方法。 透射電鏡的成像是由一定強(qiáng)度的電子束穿透標(biāo)本而成像。由于電子射線的穿透能力比較低,電鏡又需要很高的分辨率和放大率,因此,電鏡標(biāo)本的超薄切片厚度一般要在 0.03~ 0.05μm,以獲得高分辨率的超微結(jié)構(gòu)圖像。超薄切片制作過程包括取材、固定、脫水、滲透、包埋、切片和染色等環(huán)節(jié)。 1. 取材是超薄切片技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。由于生物組織離體后,細(xì)胞會立即釋放出各種水解酶引起細(xì)胞自溶,使細(xì)胞內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。因此,為盡可能避免產(chǎn)生人工假象,取材時有以下要求: (1)取材要快,一般要求在 1min內(nèi)把組織塊浸入固定液。(2)組織塊要小,一般切成 0.5~ 1.0mm。 (3)所用固定液及容器須預(yù)冷,以降低離體細(xì)胞內(nèi)水解酶的活性,盡可能減少細(xì)胞自溶。 (4)由于電鏡觀察視野小,具有很大的局限性,所以,選擇部位要準(zhǔn)確可靠。 (5)切割組織的刀和剪必須鋒利潔凈,避免拉、鋸、壓等動作造成細(xì)胞損傷。 2. 固定 (1)固定的作用:①破壞細(xì)胞的酶系統(tǒng),阻止細(xì)胞的自溶;②穩(wěn)定細(xì)胞物質(zhì)成分,如核酸、核蛋白、糖類和脂類,使之發(fā)生交聯(lián),減少或避免抽提作用,以保存組織成分;③在一些細(xì)胞組分之間以化學(xué)反應(yīng)和物理反應(yīng)建立交聯(lián),以提供一個骨架來穩(wěn)定各種細(xì)胞器的空間構(gòu)型;④提供一定的電子反差。 (2)常用的固定劑 1)四氧化鋨(osmium tetroxide):俗稱鋨酸,為一種強(qiáng)氧化劑,為淺黃色結(jié)晶,其分子式 OsO4,熔點(diǎn) 41℃,沸點(diǎn) 131℃,在水中的溶解度為 7.24%(25℃)。其水溶液為中性,有毒性。 2)戊二醛(glutaraldehyde):分子式為 C5H8O2。市售的戊二醛通常是 25%或 50%的水溶液,其 pH為 4.0~ 5.0,并保存在低溫處,且不宜存放時間過長。 3)高錳酸鉀:一種強(qiáng)的氧化劑,對磷脂蛋白類有特別良好的固定作用。可用于保護(hù)細(xì)胞的膜相結(jié)構(gòu),如細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等。尤其是對神經(jīng)髓質(zhì)效果更為顯著,但對于胞內(nèi)的顆粒性或纖維狀結(jié)構(gòu)幾乎不能固定。常用于植物葉綠體結(jié)構(gòu)及神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)的研究。 (3)固定方法:目前,用于生物樣品超薄切片技術(shù)的主要固定方法是化學(xué)固定法。采用戊二醛(或戊二醛 +多聚甲醛)固定 l~ 3h后,經(jīng)相應(yīng)的緩沖液沖洗,再用 1%鋨酸后固定 1~ 2h。 (4)固定時注意事項(xiàng) 1)固定液濃度要適宜,一般戊二醛常用濃度為 1%~ 4%,鋨酸為 1%~ 2%。 2)固定液的滲透壓須調(diào)節(jié)到接近組織、細(xì)胞的生理值。固定液的滲透壓是通過改變緩沖液的濃度或者通過增加鈉、鈣和鎂等電解質(zhì)或葡萄糖和蔗糖等非電解質(zhì)來調(diào)節(jié)的。 3)固定液的 pH:須接近所要固定組織的 pH。由于大部分動物組織的平均 pH約7.4,因此,電鏡固定液的 pH都在 7.2~ 7.4之間。 4)固定時的溫度:理論上,低溫能降低酶的活性,減少細(xì)胞自溶和胞內(nèi)物質(zhì)的抽提,因此大部分樣品宜在 0~ 4℃
- >
推拿
- >
中國歷史的瞬間
- >
伊索寓言-世界文學(xué)名著典藏-全譯本
- >
羅庸西南聯(lián)大授課錄
- >
企鵝口袋書系列·偉大的思想20:論自然選擇(英漢雙語)
- >
新文學(xué)天穹兩巨星--魯迅與胡適/紅燭學(xué)術(shù)叢書(紅燭學(xué)術(shù)叢書)
- >
詩經(jīng)-先民的歌唱
- >
羅曼·羅蘭讀書隨筆-精裝